Introdução: A fibroína de seda (FS), um polímero natural, tem sido amplamente explorada no campo farmacêutico, mas seu uso na Odontologia ainda é incipiente. A incorporação da morina – flavonoide com atividade antimicrobiana reconhecida, porém com baixa estabilidade, solubilidade e biodisponibilidade – à FS representa uma estratégia promissora para potencializar sua ação terapêutica. Objetivo: Desenvolver, sintetizar e caracterizar nanopartículas baseadas em fibroína de seda contendo morina (NPFS-M) e avaliar in vitro sua atividade antimicrobiana, antibiofilme e antiacidogênica em biofilme de Streptococcus mutans. Método: As nanopartículas foram sintetizadas a partir de casulos de Bombyx mori e caracterizadas por espalhamento dinâmico da luz (DLS) no dia da síntese e após 7, 15 e 30 dias. A estrutura secundária foi avaliada por espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e a morfologia por microscopia eletrônica de transmissão (TEM). Além disso, foram analisadas a eficiência de encapsulação e a liberação in vitro da morina em diferentes pHs. A atividade antimicrobiana, antiacidogênica e antibiofilme foi avaliada em biofilmes de S. mutans por meio da análise da viabilidade microbiana (UFC/mL), acidogenicidade do biofilme e biomassa (cristal violeta). Resultado: As NPFS-M apresentaram valores ideais de tamanho de partícula (53,5±3,7 nm), índice de polidispersão (0,352±0,032) e potencial zeta (45,9±0,60 mV), mostrando estabilidade, morfologia homogênea, superfície porosa e estrutura cristalina. A eficiência de encapsulação de morina foi de 55%, com liberação gradual e dependente do pH (69% em pH 7,4, 59% em pH 6,0 e 16% em pH 4,5). Além disso, reduziram significativamente a biomassa, viabilidade e acidogenicidade do biofilme de S. mutans em comparação aos controles. Conclusão: As NPFS-M foram desenvolvidas com sucesso, apresentando propriedades físico-químicas favoráveis, liberação controlada e pH dependente e ação eficaz contra fatores de virulência do biofilme de S. mutans.