Introdução: A fotobiomodulação consiste na aplicação de luz que inibe ou estimula processos biológicos celulares, e por contribuir com mecanismos de reparação e regeneração tecidual tem sido estudada como uma alternativa para terapia pulpar vital de dentes decíduos. Objetivo: O objetivo do estudo foi avaliar a viabilidade celular de células tronco da polpa de dentes decíduos esfoliados (SHED) em diferentes densidades, meios de cultura e períodos de adesão após fotobiomodulação (FBM). Método: SHED foram cultivadas em DMEM e MEMα com 10% SFB em diferentes densidades celulares: 2x103 (G1; G2), 1x104 (G3; G4), e 2x104 (G5; G6). Decorridas 24 e 48h de adesão celular, a viabilidade celular foi avaliada por MTT nos períodos de 6, 12 e 24h, analisados por ANOVA, seguido do teste de Tukey (p<0,05). Resultados: A análise intragrupo demonstrou diferença quando da comparação dos grupos G1 e G2 nos três períodos. A comparação intergrupos para os diferentes meios de cultura apresentou diferença significantes em todos os períodos. Houve interação entre densidade celular, tempo e adesão (p<0.001). Após 24h de adesão, G3 apresentou aumento significante na viabilidade celular entre os períodos. Em 48h, G3 e G4 apresentaram redução na viabilidade celular. Nos períodos de 24 e 48h todos os grupos apresentaram maior viabilidade que os grupos G1 e G2. A comparação da adesão celular nos diferentes períodos revelou que em 6h, G3 e G4 apresentaram menor viabilidade, enquanto G5 e G6 apresentaram os melhores resultados. Após 24h da irradiação os grupos G3, G5 e G6 apresentaram os melhores resultados de viabilidade comparados ao período de 48h. Conclusão: Conclui-se que o meio de cultura não influencia a viabilidade celular após FBM. Maiores densidades e períodos de adesão mais curtos acarretam melhor viabilidade celular.