Introdução: O Carcinoma Espinocelular (CEC) é uma neoplasia epitelial invasiva, cuja evolução pode resultar em invasão linfonodal e metástases. As colagenases, especialmente as metaloproteinases da matriz (MMP), são enzimas proteolíticas que degradam componentes da matriz extracelular e membrana basal, o que pode facilitar a invasão e migração das células tumorais. Objetivo: Este trabalho teve como objetivo analisar a atividade de colagenases em amostras de CEC oral invasivo. Método: Foram utilizadas amostras coletadas a partir de biópsias de lesões orais realizadas na Clínica Odontológica da Universidade de Ribeirão Preto entre 2021 e 2023, com diagnóstico final de CEC, obtido a partir da análise histopatológica pelo Laboratório de Patologia da Universidade. As amostras foram submetidas a cortes histológicos em micrótomo automático, seguido do ensaio de zimografia in situ, que consiste na aplicação de um substrato de gelatina, que, ao ser degradado por colagenases, gera uma fluorescência. Então, as amostras foram analisadas em microscópio de fluorescência. Resultados: Todas as amostras avaliadas apresentaram atividade colagenolítica. Os tumores mais invasivos apresentaram atividade em maior profundidade. Conclusão: Desta forma, foi possível concluir que existe uma correlação da progressão/invasão do CEC oral e a atividade de colagenases.