Introdução: Na engenharia de tecidos, a porosidade dos scaffolds gera um importante impacto na atividade celular. Objetivo: Neste estudo, foram desenvolvidos scaffolds de quitosana (CH) e quitosana-cálcio (CH-Ca) com uma rede de macro canais a fim de favorecer a infiltração celular e a neo-deposição tecidual. Metodologia: Utilizando moldes impressos em 3D com diferentes geometrias, os scaffolds foram criados com canaletas de diâmetros de 500 ou 700 µm, espaçadas em 500, 700 ou 900 µm. A caracterização físico -química incluiu análise topográfica (microscopia eletrônica de varredura), composição química (espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier - FTIR), liberação de cálcio, degradabilidade e intumescimento. Para a caracterização biológica, foi utilizada uma cultura primária de células pulpares humanas (HDPC) em análises de viabilidade celular (Alamar Blue), adesão e espalhamento (F-actina), atividade de fosfatase alcalina (ALP, ensaio de ponto final) e quantificação de cálcio (Alizarin Red). Os dados foram analisados qualitativamente ou com os testes t-Student e ANOVA/Tukey (α=.05; n=6). Resultados: Alguns scaffolds do grupo CH-Ca (500/500, 700/500 e 700/900) exibiram canais mais definidos. A análise FTIR confirmou a complexação do cálcio na estrutura da quitosana. Houve leve intumescimento nos scaffolds, mas todos mantiveram a massa úmida por até 14 dias. A liberação cumulativa de cálcio foi superior nos scaffolds CH-Ca. A viabilidade celular foi superior em alguns grupos CH apenas aos 7 dias, e a densidade celular foi maior nos grupos com canaletas de 700 µm após 14 dias. A atividade de ALP aumentou aos 7 dias nos grupos CH-Ca, especialmente com canaletas de 700 µm, diminuindo aos 14 dias. A deposição de matriz mineralizada foi intensamente maior nos scaffolds CH-Ca, com destaque para os grupos 700/700 e 700/900. Conclusão: Conclui-se que o uso de moldes impressos em 3D foi eficaz na criação de macro-canais orientados nos scaffolds, com os canais de 700 µm gerando maior benefício à atividade celular.