Avaliação de Scaffolds fibrilares de policaprolactona contendo nanohidroxiapatita para indução da osteogênese
Helena de Oliveira DERÓBIO, Ana Clara Ribeiro NICODEMO, Isabela dos Reis SOUZA, Fernanda Gonçalves BASSO, Carlos Alberto DE-SOUZA-COSTA, Taisa Nogueira PANSANI
Resumo
Introdução: Scaffolds fibrilares contendo hidroxiapatita são utilizados para regeneração tecidual, e servem como suporte para adesão, proliferação e diferenciação celular, favorecendo a neoformação óssea. Objetivo: confeccionar e caracterizar scaffolds de policaprolactona (PCL) contendo 2,5 ou 5% de nano-hidroxiapatita (nHA) e avaliar a citocompatibilidade desses biomateriais em cultura de osteoblastos (MC3T3). Método: Soluções de PCL contendo ou não nHA foram eletrofiadas para obter scaffolds fibrilares, os quais foram caracterizados quanto a espessura das fibras (n=240) e porosidade (n=8) por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e sua composição verificada em Espectroscopia por Energia Dispersiva (EDS). Além da análise de liberação de cálcio (n=6), os scaffolds foram avaliados em Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR). Então os osteoblastos (MC3T3) foram semeados sobre os scaffolds e analisados quanto a viabilidade (AlamarBlue, n=8), síntese de proteína e fosfatase alcalina (PT e ALP, n=8), formação de nódulos de mineralização (NM, n=8), adesão celular (Actin red, n=2) e viabilidade por microscopia de fluorescência (Live or Dead, n=2). Os dados foram submetidos a análise estatística (=5%). Resultados: Scaffolds sem nHA exibiram fibras mais espessas (p<0,001). Quanto maior a incorporação de nHA nos scaffolds, maior a porosidade e picos de P e Ca (p<0,05), bem como mais amplos os picos que representam o grupo P-O (FTIR). Houve maior liberação de cálcio entre 7 e 14 dias. Maior viabilidade celular foi verificada no grupo 2,5% de nHA em 21 dias. Maior síntese de PT nos grupos contendo nHA. Maior atividade de ALP no grupo contendo 2,5% de nHA. Aumento na deposição de NM quanto maior a concentração de nHA. Maior adesão e número de células vivas nos grupos contendo nHA. Conclusão: Scaffolds fibrilares de PCL contendo nHA, principalmente na concentração de 2,5% apresentam ótimas propriedades físico-químicas, além de estimularem osteoblastos in vitro.