Introdução: O rato da linhagem Wistar é amplamente utilizado como modelo experimental em pesquisas odontológicas. Compreender os aspectos morfofuncionais do seu aparelho mastigatório permitirá gerar hipóteses e interpretações de resultados mais fidedignos e aplicáveis à Odontologia. Objetivo: Estimar a força dos músculos da mastigação do rato da linhagem Wistar através do método do CSA (cross-sectional area). Material e método: Foram utilizados 6 ratos machos (Rattus norvegicus albinus), linhagem Wistar, com 2 meses de idade (200- 250g). Foi realizada a dissecção detalhada de uma cabeça de rato para evidenciar as origens e inserções musculares de interesse e o sentido das fibras. As imagens microtomográficas das cabeças dos ratos foram importadas no software Materialise Mimics v.18 (Materialise, Bélgica) para estudo anatômico das estruturas musculares e segmentação. Os músculos analisados foram: masseter, temporal, pterigoide interno e pterigoide externo. Para determinar a arquitetura das fibras musculares dos músculos da mastigação foi utilizado o método do CSA: área transversal do músculo. Os valores de CSA foram multiplicados pela tensão específica do músculo (22,5 N/cm²) para obter os valores de força muscular de cada camada muscular em cada músculo da mastigação. Os dados do CSA e da força muscular obtidos foram tabelados e foi aplicada análise descritiva. Resultados: Os valores de CSA obtidos a partir da reconstrução tridimensional dos músculos são importantes pois permitem o cálculo da estimativa de força de cada músculo quando multiplicados pelo valor da tensão específica muscular. Conclusão: Esse método para obtenção da estimativa de força dos músculos da mastigação do rato Wistar, a partir do cálculo da medida do CSA, sugere ser um método possível e confiável, pois esse valor da estimativa de força e poderá ser utilizado em estudos experimentais futuros.