Introdução: A determinação do comprimento de trabalho restringe a instrumentação biomecânica ao canal radicular, sem danos periapicais, levando à menor reação inflamatória e menor desconforto pós-operatório quando comparada à instrumentação além do forame. Na biopulpectomia, a preservação da vitalidade do coto periodontal visa o processo de reparo periapical. Objetivo: Avaliar in vivo a precisão de três localizadores foraminais na detecção do limite da constrição apical, atingindo ou não o forame em biopulpectomia. Material e Método: Foram utilizados os localizadores Root ZX II, E-PEX e FIND. Noventa dentes unirradiculados com indicação de exodontia foram incluídos no estudo. Após teste de sensibilidade pulpar positivo, foi realizada anestesia, acesso à câmara pulpar e exploração com lima manual K#15, sob isolamento absoluto. Após instrumentação cervical e média com Reciproc R25, uma lima #15 foi utilizada como instrumento padrão para a odontometria, introduzida no canal, formando 2 grupos: grupo Constrição Apical (introduzido até marca 0.5) e grupo Forame (introduzido até marca 0.0 e recuo até marca 0.5), sem remover a lima do canal. A lima foi estabilizada com resina flow e teve sua haste metálica cortada. Após exodontia, os dentes foram imersos em hipoclorito de sódio 5,25% por 10 minutos para remoção de tecidos orgânicos remanescentes e armazenados em soro fisiológico. Após microtomografia (SkyScan 1272), o software CTAN foi utilizado para reconstrução e medição da ponta do instrumento até centro da constrição e do forame apical, fornecendo dados para análise comparativa. Resultado: Houve diferença estatística em detectar a constrição, após alcançar o forame, onde Root ZX II mostrou maior precisão (P0.05) na precisão dos três localizadores foraminais em detectar a constrição apical sem alcançar o forame. Conclusão: Com base nos resultados, conclui-se que não há necessidade de lesar o coto periodontal ao realizar odontometria em dentes vitais.