Este trabalho teve como objetivo avaliar a formação da camada híbrida e a resistência de união em dentina após o tratamento com um sistema adesivo total-etching, em função do protocolo de limpeza da superfície impregnada com cimento à base de resina epóxi (AH Plus), com o etanol a 95% (E) ou o xilol (X) e condicionamento ácido e hibridização, realizados imediatamente após a limpezada dentina (DEI) ou após 7 dias (DEP). Foram selecionados quarenta fragmentos de dentina impregnados com o cimento endodôntico e divididos em quatro grupos (n=10): G1(E+DEI); G2(X+DEI); G3(E+DEP) e G4(X+DEP). Após o preparo dos espécimes, imagens foram obtidas em microscopia laser confocal e a camada hibrida formada mensurada com o programa Image J. Após a realização dos protocolos descritos, em cada espécime foram fixadas matrizes de resina composta e submetidas ao teste de microcisalhamento. Os resultados obtidos na formação da camada hibrida foram submetidos ao teste de ANOVA e Tukey e os de microcisalhamento aos testes de Kruskal Wallis e Dunn (α=5%). Os grupos G2 e G4 proporcionaram maior formação de camada hibrida que os demais grupos (P0,05). A resistência de união do sistema adesivo na dentina foi similar entre os grupos (P>0,05). Concluímos que o xilol, independentemente do momento do condicionamento ácido, proporcionou maior formação de camada hibrida na dentina. Entretanto, a resistência de união do sistema adesivo na dentina, após os protocolos avaliados, foi semelhante entre os grupos avaliados.