RESUMO: A Inativação Fotodinâmica mediada pela curcumina tem sido uma alternativa promissora para a redução de microrganismos, porém sua eficácia em biofilmes in situ necessita ser melhor avaliada. Este estudo avaliou a eficácia da Inativação Fotodinâmica mediada por curcumina veiculada em cristal líquido, em biofilmes multiespécies formados in situ. Treze voluntários utilizaram um dispositivo palatino contendo blocos de esmalte bovino (48h) para formação de biofilme. Após, os blocos de esmalte foram removidos e aleatoriamente distribuídos em dois grupos (PDI: Curcumina a 160 µM + Luz de 18J/cm2; Controle: veículo Cristal Líquido durante 29’17’’ no escuro). As amostras foram plaqueadas em meios de cultura preditivos para Streptococcus mutans e Candida spp. e incubados em estufa microbiológica (48h, 37ºC), seguida pela quantificação de colônias. Os dados foram transformados em log de base 10, analisados descritivamente e através de intervalos com 95% de confiança para as médias. De acordo com os intervalos de confiança, a diminuição do crescimento de colônias foi estatisticamente significativa. O tratamento fotodinâmico reduziu o crescimento de colônias em cerca de 1,6 e 1,9 logs para Streptococcus mutans e Candida spp., respectivamente, em relação ao grupo não tratado. Além disso, observou-se variabilidade de resposta ao tratamento entre os diferentes indivíduos, sugerindo que características individuais do biofilme e microbiota possam influenciar no efeito fotodinâmico. A curcumina veiculada em cristal líquido foi eficaz na redução de viabilidade de Streptococcus mutans e Candida spp. presentes no biofilme dental formado in situ.