O desenvolvimento de terapias antifúngicas eficazes e seguras tem sido objeto de estudo de inúmeros trabalhos que utilizam a técnica do plaqueamento e contagem de colônias para verificação da eficácia dos tratamentos. Nesse contexto, a calibração dos pesquisadores é fundamental para se obter dados com confiabilidade. Apesar disso, esta etapa é frequentemente negligenciada em microbiologia aplicada. Assim, este estudo teve como objetivo propor um método de avaliação da confiabilidade para contagem de colônias de C. albicans. Para isso, alíquotas de suspensões fúngicas padronizadas (C. albicans ATCC 90028) foram diluídas e plaqueadas em meio de cultura de acordo com metodologias estabelecidas na literatura (n=20). Após incubação das placas de Petri (37ºC/48h), estas foram colocadas sobre um fundo preto e fotografadas com uma câmera digital. Após treinamento dos examinadores, o número de colônias foi contabilizado nas imagens, permitindo que as colônias de uma mesma placa fossem analisadas mais de uma vez. Considerou-se como variável dependente o número de unidades formadoras de colônias por mililitro, após transformação em log10. A contagem das colônias foi realizada utilizando-se o software Adobe Photoshop por dois examinadores (E1; E2) cegos em relação à amostra aferida, em dois momentos (intervalo de 24h). A reprodutibilidade intra/inter-examinadores foi avaliada com o Coeficiente de Correlação Intraclasse (CCI). Os valores de CCI obtidos na análise da reprodutibilidade intra e inter-examinadores foram 0,99 (para E1 e E2) e 0,98, respectivamente. Ambos os valores foram classificados como ‘Excelente’ de acordo com a literatura.