A utilização de neurotraçadores tem revolucionado, nas últimas três décadas, o conhecimento sobre o padrão de conexões entre as estruturas periféricas e o sistema nervoso. Entre os neurotraçadores, a peroxidase do rábano silvestre (HRP) tem sido a mais utilizada. Mais recentemente, combinações desse neurotraçador com a aglutinina do germe do trigo (WGA) ou com a subunidade B da toxina colérica (CTB) têm demonstrado um considerável aumento na captação dos conjugados resultantes (HRP-WGA, CTB-HRP), com melhora sensível na capacidade de traçar conexões neurais. No presente experimento, foram testados ambos os conjugados e o HRP livre no contexto de um amplo estudo sobre o núcleo do nervo hipoglosso do rato, responsável pela inervação motora da língua. Para isto, foram injetados na metade posterior da língua de cada rato 10 pl de HRP (20%) ou 10 11 de CTB-HRP (0,15% de toxina colérica + 12% HRP) ou 10 ul de HW-WGA (5% de WGA + 30% HRP). Após um período de sobrevivência de 48 horas, os animais foram perfundidos com uma solução de aldeídos e, posteriormente, os encéfalos foram cortados em criostato (40 p). Os cortes foram submetidos a reação histoquímica do HRP, utilizando-se a tetrametilbenzidina como cromógeno. Os resultados indicam que, tanto desde o ponto de vista qualitativo como até quantitativo, os conjugados são mais eficientes para evidenciar conexões neurais que o HRP livre. Os conjugados HRPWGA e CTB-HRP apresentam qualidades semelhantes, embora este Úitimo seja mais eficiente para evidenciar detalhes na arborização dendritica e características morfológicas gerais dos motoneurônios. Essa superioridade do conjugado CTB-HRP pode estar relacionada com a abundância de gangliosídeos do tipo GM1 na membrana pré-sinaptica das junções neuromusculares. Esses gangliosídeos formam um grupo de receptores específicos para componentes da subunidade B da toxina colérica, o que potencializa a captação da mesma pelos terminais axônicos.

The use of neurotracers has revolutionized in the last three decades the knowledge on the connectivity between th e peripheral structures and the nervous system. Between these neurotracers, the horseradzsh peroxidase (HRP) has been the most used. Recently, combinations of this neurotracer with the wheat germ agglutinin (WGA) or with the sub-unit B of the cholera toxh (CTB) have demonstrated a substantial increase in the transport of the resulting conjugates (HRP- WGA, CTB-HRP), with a sensible improvement in their capacity to trace neuronal connections. In order to compare these different neurotracers, we injected in the posterior half of the tongue of rats 10ul of free HRP (20%) or 10 ul of CTB-HRP (0.15 % of cholera toxin + 12% HRP) or 10 um of HRP- WGA (5% of WGA + 30% HRP). After a 48-hour survival period, the animals were perfused with an aldehyde mure and, later on, the brains were cut in a freezing microtome. Brain stem slices were submitted at the histochemical reaction, using tetramethylbenzidine as cromogen, and the hipoglossal nucleus, responsible for the tongue motor innervation, was studied. Our results indicate that the conjugates HRP-WGA and CTB-HRP are more efficient than the free HRP. The conjugates have simdar efficiency, although the CTB better marks the dendntic tree. This characteristic of the conjugated CTB-HRP could be associated with the abundante of GM1 ganglioside in the pre-synaptic membrane of the neuromuscular junction. These gangliosides form a group of specific receptors for components of the cholera toxin B subunit, that increase their reception for the axonic terminal.